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GÉLOSE TCBS
(Thiosulfate, Citrate, Bile, Saccharose)
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Milieu sélectif pour l’isolement des Vibrio

COMPOSITION: en grammes par litre d'eau distillée

Peptone de caséine............................5
Peptone de viande.............................5
Extrait de levure................................5
Citrate de sodium..........................10
Thiosulfate de sodium...................10
Bile de boeuf.....................................5
Cholate de sodium............................3
Saccharose.....................................20
NaCl...............................................10
Citrate ferrique...............................1
Bleu de thymol............................0,04
Bleu de bromothymol.................0,04
Agar.................................................14
                                    pH = 8,6

 

PRINCIPE, INTERET


Ce milieu est rendu sélectif des vibrions par la présence de:

  • Fortes concentrations en thiosulfate et citrate
  • Forte alcalinité du milieu (pH=8,6)
  • Cholate et bile.

Ces caractéristiques permettent le ralentissement de la croissance des entérobactéries et des entérocoques.

Il permet la lecture de l'utilisation du saccharose (saccharose + BBT + BT) et de la production d'H2S (thiosulfate de sodium et citrate ferrique)
Les colonies de Vibrio, saccharose + et H2S -, apparaissent jaunes sans centre noir.

NB1: quelques souches de Proteus, saccharose +, peuvent donner des colonies analogues à celles des vibrions.
NB2: l'addition de bleu de thymol au BBT permet un virage net au jaune lors de l'acidification, même en milieu alcalin.

LECTURE: après 24 heures à 37°C en aérobiose

1°) Fermentation du saccharose
Colonies jaunes: acidification, bactéries saccharose +.
Colonies bleues: absence d’acidification, bactéries saccharose –.

2°) Production d’H2S
Colonies noires ou à centre noir: production de sulfure de fer noir due à la réduction du thiosulfate en H2S: souche H2S +.
Colonies sans centre noir: absence de production de sulfure de fer par réduction du thiosulfate en H2S: souche H2S -.

Orientation :
Colonies jaunes: orientation vers Vibrio cholerae, V.alginolyticus.
Colonies bleu/vert: orientation vers V. parahaemolyticus.

 

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Par Brigitte VERON - Collectif Photo-Reims