Le contenu de cette page nécessite une version plus récente d’Adobe Flash Player.

Obtenir le lecteur Adobe Flash

 
GELOSE CHOCOLAT POLYVITAMINEE (= enrichie = supplémentée) + BACITRACINE
Accueil diaporamas milieux d'isolement examens microscopiques métabolismes produits pathologiques systématique bactérienne virologie mycologie antibiogramme sécurité
   
 
 

Rechercher sur le site

 

Milieu très riche sélectif pour l’isolement des Haemophilus

 

COMPOSITION: en grammes par litre d'eau distillée

Peptone trypsique de caséine.................7,5
Peptone pepsique de viande…………...7,5
Amidon de maïs.....................................1
Hydrogénophosphate de potassium…...4
Dihydrogénophosphate de potassium…1 
NaCl……………………………………5
Hémoglobine…………………………..10
Supplément glucosé, vitaminé………..10 mL
Bacitracine………………….…………50 kUI
Agar……................................................15
                                pH final = 7,2

 

PREPARATION


1. Liquéfier une base chocolat (8 mL) au bain-marie bouillant (base chocolat = gélose Columbia)
2. Attendre son refroidissement à 45°C (milieu en surfusion).
3.Y ajouter stérilement les 8 mL de solution stérile d’hémoglobine à 2%, 3 gouttes de pipette Pasteur de supplément vitaminé et 3 gouttes de solution de bacitracine.
4. Homogénéiser en faisant rouler le tube entre les mains.
5. Couler en grande boîte de Pétri.

 

PRINCIPE, INTERET

  • La gélose chocolat polyvitaminée est un milieu très riche : l’hémoglobine du milieu apporte le facteur X (=hématine) et le supplément vitaminé apporte le facteur V (=NAD+) qui permettent la culture de bactéries très exigeantes, en particulier en facteurs X et V (Haemophilus et certaines espèces de Neisseria).
  • La bacitracine présente sélectionne les Haemophiluscar la CMI de la plupart des autres bactéries pour la bacitracine est généralement inférieure à la concentration utilisée dans le milieu.

 

LECTURE


Après 24 à 48 heures à 37°C en atmosphère enrichie en CO2 :

  • Haemophilus influenzae donne des colonies lisses ou muqueuses (souches capsulées), de taille variable
  • Haemophilus parainfluenzae donne des colonies rugueuses le plus souvent. 

 

Creative Commons License
Ce site est mis à disposition sous un contrat Creative Commons.  
Par Brigitte VERON - Collectif Photo-Reims