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GÉLOSE DESOXYCHOLATE CITRATE LACTOSE
(gélose DCL ou milieu de Leifson modifié par Hynes)
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Milieu sélectif pour l’isolement des bactéries à Gram négatif
(Salmonella et Shigella)

 

COMPOSITION: en grammes par litre d'eau distillée

Extrait de viande .......................................................5
Peptone bactériologique.............................................5
Désoxycholate de sodium........................................5
Thiosulfate de sodium.............................................5,4
Citrate ferrique……………………………………1
Citrate de sodium.....................................................8,5
Lactose......................................................................10
Rouge neutre…………………………………..…..0,02
Agar……..................................................................12
                                      pH final = 7,3

 

PRINCIPE, INTERET


C’est un milieu rendu sélectif par la présence de :

  • Désoxycholate qui inhibe les bactéries à Gram positif
  • La forte concentration en citrate qui inhibe également les bactéries à Gram positif.

De plus, il contient :

  • Du lactose et du rouge neutre qui permettent de mettre en évidence l’utilisation du lactose
  • Du thiosulfate de sodium et du citrate ferrique qui permettent de mettre en évidence la production d’H2S par réduction du thiosulfate.

Intérêt : isolement des salmonelles et des shigelles dans les selles ou les denrées alimentaires.

 

LECTURE: après 24 heures à 37°C en aérobiose, en général 

1°) Utilisation du lactose:
Colonies rouges: acidification du milieu par fermentation du lactose : bactéries lactose +
Colonies incolores: absence d'acidification du milieu : bactéries lactose -.

2°) Production d'H2S:
Colonies noires ou à centre noir: production de sulfure de fer noir due à la réduction du thiosulfate en H2S: bactéries H2S +.
Colonies sans centre noir: absence de production de sulfure de fer par réduction du thiosulfate en H2S: bactéries H2S -.

Orientation :

  • Colonies incolores à centre noir : suspicion de Salmonella
  • Colonies incolores sans centre noir : suspicion de Shigella ou Salmonella

 

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Par Brigitte VERON - Collectif Photo-Reims