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Recommandations pour la réalisation de l'antibiogramme standard

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CASFM 2013 (pages 5-6-7)

 

Milieu

Inoculum

Ensemencement

Lecture

 

 

  • Enterobacteriaceae
  • Bacilles à Gram négatif non fermentaires (Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter spp, Stenotrophomonas maltophilia,…)
  • Staphylococcus spp
  • Enterococcus spp

 

MH

Mac Farland 0,5 en eau physiologique ou bouillon MH, dilué au 1/10 ou 1/100

     1 mL     1 mL

Préparation de l'inoculum pour un antibiogramme standard

McF     eau j   eau j
  0,5      9 mL    9 mL

flèches



inondation avec la dilution au 1/100
ou
écouvillonnage avec la dilution au 1/10

18 à 24 heures à 35-37°C

Cas particulier de Staphylococcus aureus pour l’oxacilline

MH
ou MH hypersalé
(2 à 4%)

Mac Farland 0,5 en eau physiologique ou bouillon MH, dilué au 1/10

inondation ou écouvillonnage

18 à 24 heures à 35-37°C si milieu hypersalé ou à 30°C si MH classique
(prolonger à 48H si croissance faible)

  • Streptococcus pneumoniae
  • Streptococcus spp

MH + 5% sang de mouton
Pour le cotrimoxazole: MH + 5% sang cheval hémolysé

Mac Farland 0,5 en eau physiologique ou bouillon MH, dilué au 1/10 ou pur

inondation avec dilution au 1/10 ou écouvillonnage avec inoculum pur

18 à 24 heures à 35-37°C

Haemophilus influenzae

Gélose chocolat PolyViteX ou milieu HTM (MH + NAD+ hémine + extrait de levure )

Mac Farland 0,5 en eau physiologique ou bouillon MH, dilué au 1/10

inondation ou écouvillonnage

18 à 24 heures à 35-37°C

Neisseria meningitidis

MH + 5% sang de mouton

Mac Farland 0,5 en tampon phosphate M/15 pH 7,2

inondation ou écouvillonnage
(60 mm entre les disques)

18 à 20 heures à 35-37°C en atmosphère contenant 5% de CO2

Neisseria gonorrhoeae

Gélose chocolat PolyViteX

Mac Farland 0,5 en tampon phosphate M/15 pH 7,2

inondation ou écouvillonnage
(60 mm entre les disques)

18 à 24 heures à 35-37°C en atmosphère contenant 5% de CO2
(après 36 à 40 heures si la croissance est insuffisante)

Campylobacter spp

MH + 5% sang de mouton ou de cheval

Mac Farland 0,5 en eau physiologique ou bouillon Brucella, dilué au 1/10

inondation ou écouvillonnage

18 à 24 heures à 35-37°C en microaérobiose ou en anaérobiose selon la souche

Anaérobies

Gélose Wilkins Chalgren + 5% de sang ou gélose Brucella + vitamine K1 + 5% de sang

Mac Farland 1 en bouillon Brucella ou Schaedler
(régénéré avant emploi)

écouvillonnage

48 heures à 35-37°C en anaérobiose

 

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Par Brigitte VERON - Collectif Photo-Reims